Souche ionique et activité de la cellulase
Sélection de souches de Cellulase
La sélection des souches est un travail fondamental dansCellulaseproduction, et de nombreux experts nationaux et internationaux ont mené des recherches approfondies. Afin de produire des produits de haute qualité,CellulaseProduits, Wang Jialin et al. (1996), s'appuyant sur l'expérience nationale et internationale, ont successivement introduit Trichoderma viride 10, Trichoderma viride Sn-91014, Aspergillus niger NT-15 et Aspergillus niger XX-15A. Sur cette base, des méthodes de mutagenèse physique et chimique telles que les rayons ultraviolets, les ondes électromagnétiques spécifiques, l'accélérateur linéaire et la nitrosoguanidine ont été utilisées pour obtenir les souches à haut rendement NT15-H, NT15-H1, XT-15H et XT-15H1. L'activité en culture solide de Trichoderma NT-15H a été testée par le Centre de contrôle et d'essais de la qualité des aliments du ministère de l'Industrie légère à la gare de Nanjing, et l'activité du papier filtre était de 3 670 µg.Cellulase L'activité enzymatique C1 était de 24460u/g, etCellulase L'activité enzymatique Cx était de 1 800 µg, atteignant le niveau international avancé. Cette souche présente des performances stables en production industrielle. Zhang Linghua et al. (1998) ont utilisé les souches Trichoderma harzianum W-925 et J-931 et ont obtenu la souche Wu-932.Cellulase souche à forte activité enzymatique après mutagenèse composite avec 2 % de sulfate de diéthyle et rayonnement ultraviolet (15 W, 30 cm, 2 min).Cellulase La souche avait un pouvoir de saccharification CMC de 2975 et une activité enzymatique sur papier filtre de 531, soit respectivement 100 % et 81 % de plus que la souche de départ W-925. Wang Chengshu et al. (1997), du Centre de service des technologies des additifs alimentaires du ministère de l'Industrie chimique, ont utilisé la souche Trichoderma reesei A3 du centre pour subir une mutagenèse par UV et par nitrosoguanidine. Les spores traitées ont été inoculées sur une plaque bicouche de fibres, cultivées à 30 °C pendant 5 à 8 jours, puis laissées à 15 °C pendant 7 à 10 jours. Des colonies individuelles présentant un diamètre de cercle transparent et un diamètre de colonie plus grands ont été sélectionnées pour une fermentation en milieu solide dans un flacon triangulaire, puis criblées pour obtenir la souche Trichoderma reesei 91-3 à hauteCellulaseactivité.
LeCellulaseLes souches sont sujettes à la dégradation, et leur capacité de production d'enzymes diminue significativement après dégradation. Trois raisons peuvent expliquer ce phénomène :
1La souche criblée par mutagenèse subit une mutation révertante.
②Mutation négative naturelle.
③Le stockage prolongé à basse température des souches bactériennes peut entraîner la croissance d'hyphes secondaires sur les conidies. La vitalité des conidies formées par ces hyphes est alors affaiblie, ce qui peut être la principale cause de dégradation bactérienne. Afin d'éviter la dégradation desCellulaseZhang Linghua et al. (1998) ont rapporté l'utilisation de tubes de sable pour la conservation des souches. Le sable et la terre, qui sont sur le point d'être tamisés et nettoyés, sont mélangés dans un rapport 3:2 et conditionnés dans des tubes à essai. Ceux-ci sont stérilisés trois fois à une pression de 1 kg/cm² pendant 30 minutes. La souche bactérienne inclinée à conserver est préparée en une suspension de spores de 1 000 ml. 0,5 ml est injecté dans chaque tube de sable, vigoureusement agité et stocké dans un séchoir sous vide contenant du CaCl² anhydre. Après les tests,Cellulase l'activité enzymatique est restée pratiquement inchangée au cours des 121 jours testés ; le temps pourCellulase La période pendant laquelle l'activité enzymatique a diminué de 50 % a été prolongée de 60 jours à 160 jours en utilisant des méthodes conventionnelles, ralentissant ainsi considérablement le taux de dégradation bactérienne.
Facteurs affectantCellulaseactivité
Le pH optimal pourCellulaseest généralement compris entre 4,5 et 6,5. La gluconolactone peut inhiber efficacementCellulase, et les ions de métaux lourds tels que les ions cuivre et mercure peuvent également inhiberCellulase. Cependant, la cystéine peut éliminer leurs effets inhibiteurs et même activer davantageCellulaseLes tissus végétaux contiennent des substances naturellesCellulaseInhibiteurs ; ils peuvent protéger les plantes contre la pourriture causée par les moisissures, et ces inhibiteurs sont des composés phénoliques. Si l'activité oxydase est élevée dans les tissus végétaux, elle peut oxyder les composés phénoliques en composés quinoniques, ce qui peut inhiberCellulase.
