Méthodes de test pour la détection de Bacillus subtilis
B. subtilis
Bacillus subtilisest un micro-organisme commun qui est souvent utilisé dans l'industrie des aliments pour animaux, notamment dans sa production et également comme additif après la production. Sa détection est cruciale pour garantir la qualité et la sécurité des aliments pour animaux. Ce qui suit fournira une introduction détaillée aux différentes méthodes de détection, conditions et normes de test pourBacillus subtilisdans l'alimentation. Chaque méthode a ses propres avantages et inconvénients, c'est pourquoi l'utilisateur doit tenir compte de la situation et du scénario d'application spécifiques.
Méthode de culture traditionnelle
Traitement des échantillons : peser une certaine quantité d'échantillon, ajouter un diluant pour le mélange et le traitement par ultrasons pour assurer la libération et la dispersion deBacillus subtilis.
Dilution : Diluer en gradient l'échantillon traité pour garantir que chaque dilution de l'échantillon puisse être uniformément appliquée sur le milieu de culture.
Inoculation : Appliquer l'échantillon dilué sur une plaque de gélose nutritive, étiqueter le numéro d'analyse, la date et le niveau de dilution.
Culture : Placer les plaques inoculées dans un incubateur à température constante de 37 ℃ pendant 16 à 20 heures et observer la croissance des colonies bactériennes.
Observation des caractéristiques des colonies : Les colonies deBacillus subtilisprésentent généralement des formes rugueuses et irrégulières sur des milieux de culture solides, avec des colonies plus grandes de couleur blanc laiteux à blanc grisâtre.
Identification biochimique : Grâce à une série de tests biochimiques tels que le test d'oxydase, le test d'enzyme catalytique, le test de liquéfaction de la gélatine et le test de réduction des nitrates, confirmez si les bactéries isolées sontBacillus subtilis.
Méthode de biologie moléculaire
Détection PCR : La présence deBacillus subtilisLa détection se fait par amplification de la séquence spécifique de son gène par réaction en chaîne par polymérase (PCR). Cette méthode présente une sensibilité élevée et une forte spécificité, mais nécessite un équipement coûteux et des connaissances professionnelles.
PCR quantitative par fluorescence (qPCR) : Détection quantitative de la présence deBacillus subtilisen amplifiant des séquences génétiques spécifiques, avec une sensibilité et une spécificité élevées, mais nécessitant également un équipement professionnel et des connaissances opérationnelles.
Méthodes immunologiques
Dosage immuno-enzymatique (ELISA) : Il reflète indirectement le contenu deBacillus subtilisdes anticorps spécifiques dans un échantillon en détectant leur réaction de liaison avec des antigènes. Cette méthode présente une sensibilité élevée, mais peut être affectée par la qualité des réactifs et des procédures expérimentales.
Méthode des billes immuno-magnétiques : Utilisation de billes immuno-magnétiques pour capturer spécifiquementBacillus subtiliset ensuite effectuer la détection. Cette méthode présente également une sensibilité et une spécificité élevées, mais l'opération est plus complexe.
