Quelle est la méthode de détection de l’activité de la protéase alcaline ?
Quelle est la méthode de Protéase alcaline détection d'activité ?
L'activité enzymatique désigne la capacité d'une enzyme à catalyser certaines réactions chimiques. L'importance de l'activité enzymatique peut être exprimée par la vitesse de la réaction chimique qu'elle catalyse dans les conditions correspondantes. Mesure de l'activité du LiaoningProtéase alcalineL'activité enzymatique mesure la vitesse de la réaction chimique qu'elle catalyse. La vitesse de la réaction enzymatique peut être exprimée par la diminution du substrat ou l'augmentation du produit par unité de temps. Pour des raisons de sensibilité, on mesure généralement la quantité de produit produite par unité de temps. La vitesse de la réaction enzymatique pouvant diminuer progressivement au fil du temps, il est nécessaire de déterminer sa vitesse initiale pour mesurer correctement l'activité enzymatique.
Principe deProtéase alcalinePrincipe de détermination de l'activité de la méthode de Folin
Protéase alcalinePeut catalyser l'hydrolyse de la caséine en tyrosine en milieu alcalin. La tyrosine est un acide aminé contenant un groupe hydroxyle phénolique et peut réagir avec le Folin (un mélange d'acide phosphotungstique et d'acide phosphomolybdique). (Réaction de Folin au phénol : le réactif de Folin est extrêmement instable en milieu alcalin et peut facilement être réduit quantitativement par des composés phénoliques pour produire un mélange de bleu de tungstène et de bleu de molybdène, présentant une nuance de bleu différente.) Par colorimétrie, il est possible de déterminer la quantité de tyrosine produite et la quantité de tyrosine produite par l'hydrolyse de la caséine par Liaoning.Protéase alcalinedans une unité de temps est utilisé pour exprimer l'activité enzymatique, calculant ainsi l'activité enzymatique.
Procédure expérimentale pour la détermination deProtéase alcalineactivité
Préparation de la solution enzymatique : peser précisément 1 g (± 0,001 %) de poudre d’enzyme sèche, ajouter 10 ml de solution tampon (2.2.5), dissoudre dans un petit bécher et agiter avec une tige en verre. Après un moment de repos, verser délicatement la solution de la couche supérieure dans une fiole jaugée. Au milieu, ajouter une petite quantité de solution tampon à la partie sédimentée, agiter et dissoudre 4 fois de cette manière, puis transférer le tout dans une fiole jaugée de 100 ml. Compléter au trait avec la solution tampon, bien agiter et filtrer avec quatre couches de gaze. Prélever 5 ml de filtrat, le transférer dans une fiole jaugée de 100 ml, diluer au trait avec de l’eau distillée et diluer le liquide enzymatique au niveau 2 000.
Définition deProtéase alcalineactivité
Définition deProtéase alcalineunité d'activité : 1 gramme deProtéase alcalinela poudre peut produire 1 microgramme de tyrosine par minute dans des conditions de pH 10 et 40 °C, ce qui est considéré comme une unité d'activité enzymatique.
Précautions pour la détermination deProtéase alcalineactivité
1. La température, le pH et le temps de la réaction enzymatique ont un impact direct sur le nombre de liaisons peptidiques hydrolysées, ils doivent donc être strictement contrôlés.
2. Après avoir terminé la réaction avec l'acide trichloracétique, le filtrat obtenu en filtrant le mélange réactionnel doit être clair.
3. Le réactif de Folin étant sensible aux environnements acides et sujet aux variations, un ordre de mesure est requis. Il est nécessaire d'ajouter une solution de carbonate de sodium pour former un environnement alcalin, puis d'ajouter le réactif de Folin pour un fonctionnement normal.
Vous trouverez ci-dessus les articles relatifs à la protéase alcaline que je vous ai partagés. Si vous souhaitez en savoir plus sur ce sujet,Protéase alcaline, n'hésitez pas à nous contacter.
